体视显微镜（Stereo Microscope）又称解剖显微镜或立体显微镜，以其独特的双光路设计提供三维立体视觉，广泛应用于生物解剖、工业检测、电子维修、教学演示等领域。然而，不规范的操作不仅会降低成像质量，还可能缩短设备寿命。本文从操作前准备、正确使用步骤、维护保养、常见问题解决四大维度，系统梳理体视显微镜的使用规范，助力用户高效、安全地开展工作。

一、操作前准备：细节决定体验

1. 设备检查与环境适配

机械部件检查：

确认调焦旋钮、物镜转换器、光源开关无卡滞；

检查载物台夹具是否稳固，避免样品滑动。

光源校准：

环形LED光源需调整至样品表面照度均匀（建议亮度50%-70%）；

光纤卤素灯需预热10分钟，避免色温波动。

环境要求：

温度15-25℃，湿度<60%RH，防止镜头起雾或电路短路；

远离振动源（如离心机、通风橱），使用防震垫减少干扰。

2. 样品准备与放置

生物样品：

固定标本需用生理盐水保持湿润，活体样本（如果蝇）需使用CO?麻醉板；

大型样本（如植物叶片）可裁剪至载物台可容纳尺寸（建议≤10cm×10cm）。

工业样品：

金属件需去除油污，使用无尘布擦拭；

电子元件需接地处理，防止静电击穿。

放置技巧：

中心对准光轴，使用弹簧夹具固定，避免手动按压导致图像漂移。

二、正确操作步骤：规范提升效率

1. 调焦与成像优化

粗调焦：

旋转调焦旋钮至样品模糊可见，避免物镜撞击样品；

双目镜筒间距调整至与瞳距匹配（55-75mm）。

微调焦：

使用细调焦旋钮获取清晰图像，观察时保持双眼自然睁开；

活体样本需降低光源亮度（<30%）以减少光应激。

景深扩展：

缩小光圈可提升景深，但需平衡亮度与分辨率；

使用电动载物台进行Z轴层扫，后期合成全景深图像。

2. 变倍与物镜选择

变倍范围：

低倍率（0.8×-5×）适合大范围观察（如昆虫整体）；

高倍率（5×-40×）需配合辅助物镜，分辨率可达1μm。

物镜匹配：

0.5×物镜用于工业检测大工件；

2×物镜适合生物细胞级观察，需搭配高数值孔径（NA>0.1）。

3. 光源与对比度调节

透射光应用：

透明样品（如水蚤）使用底部透射LED，亮度调至80%；

半透明样品（如植物切片）启用斜射光增强轮廓。

落射光应用：

金属表面检测使用环形落射光，角度调整至45°避免反光；

塑料件观察可加装偏光片消除应力双折射。

三、维护保养：延长设备寿命的关键

1. 日常清洁规范

光学部件：

镜头清洁：先用气吹去除灰尘，再用镜头纸蘸取乙醇:乙醚=3:1混合液擦拭；

目镜维护：定期用软毛刷清理眼罩，避免皮肤油脂腐蚀镀膜。

机械部件：

调焦机构：每季度滴加1滴显微镜专用润滑油；

载物台：使用后擦拭导轨，防止锈蚀。

2. 长期存放要求

防尘防潮：

存放于干燥柜（湿度<40%RH），配备硅胶干燥剂；

镜头朝上放置，避免物镜口积灰。

电源管理：

长期不使用时拔掉电源，每3个月通电1小时防止电容老化。

3. 校准与维修

年度校准：

委托专业机构检测光轴平行度（误差需<0.1°）；

校正变倍系统线性度，确保放大倍数标称值与实际值一致。

故障处理：

图像偏色：检查光源色温，更换LED模块；

调焦卡滞：清理导轨杂质，重新涂抹润滑脂。

四、常见问题与解决方案

五、安全操作规范：防范未然

生物安全：

操作感染性样本（如病原体）需在生物安全柜内进行；

废弃标本需高温高压灭菌后处理。

电气安全：

使用三孔插座接地，避免漏电；

清洁时断开电源，禁止用湿布擦拭控制面板。

机械安全：

更换物镜时握持镜筒，避免跌落；

儿童操作需在成人监护下进行。

六、总结：规范操作的价值

体视显微镜的使用规范是科学观察与设备保护的基石。通过系统化准备、精细化操作、预防性维护，可实现：

提升成像质量（分辨率、对比度）；

延长设备寿命（减少50%以上故障率）；

保障操作安全（避免生物污染与机械损伤）。

建议实验室建立《体视显微镜SOP手册》，并定期组织操作培训。随着AI辅助对焦与3D成像技术的发展，未来体视显微镜将更加智能化，但规范操作始终是数据可靠性的前提。